【請求項1】アクレモニウム属に属するアルカリプロテアーゼ生産菌を培地にて培養してアルカリプロテアーゼを生産させ、これを採取することを特徴とする、アルカリプロテアーゼの製造法。

【請求項1】最大酵素活性が0.001ユニット/mg固型分以上のアルカリセルラーゼ0.01〜70重量％と、一種又は二種以上の界面活性剤と、その他の洗浄剤成分とを含有してなることを特徴とする、洗浄剤組成物。

【請求項1】野性株リゾプス・リゾポデイホルミスＣＢＳ227.75を変異させ、より高いプロテアーゼ生産性をもつ変異株：リゾプス・リゾポデイホルミスIII―34(CBS219.80)、リゾプス・リゾポデイホルミスIII―46(DBS220.80)、リゾプス・リゾポデイホルミスIII―59(CBS221.80)、リゾプス・リゾポデイホルミスIII―65(CBS222.80)を選択し、これを、同化可能な炭素源および窒素源を含有する培地で、3と7の間のpH値および25℃と50℃の間の温度で培養し、生産された酵素を分離することを特徴とする、リゾプス属の菌株の好気的培養により広いpH―作用範囲をもつ酸性プロテアーゼを高収量で製造する方法。

【請求項1】N-アシルサルコシン系陰イオン界面活性剤、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルエーテルおよびポリオキシエチレンポリオキシプロピレンアルキルエーテルからなる群から選ばれる非イオン界面活性剤、塩化ベンザルコニウム、アンモニウムクロリドおよびグルクロン酸クロルヘキシジンからなる群から選ばれる陽イオン殺菌剤、メチルパラベンおよびプロピルパラベンからなる群から選ばれるパラオキシ安息香酸エステル系防腐剤、および蛋白質分解酵素から選ばれる少なくとも一種の化合物をβ-1・3−D-グルカナーゼと共に使用することを特徴とするβ-1・3−D-グルカナーゼの真菌溶解活性の活性化法。

【請求項1】pH2.5〜11において100％の残存活性を示し、30〜80℃の温度で15分間処理した後少なくとも95％の残存活性を示し、pH6.5ないし中性付近に作用最適pHがあり、40〜60℃に最適温度範囲があり、トリグリセリドの1および3位のエステル結合のみを切断し、2位のエステル結合には作用しないというトリグリセリドに対する位置特異性があり、トリオレインに対する分解活性を100とすると、相対分解性は、トリカプリンに対して154、トリラウリンに対して89であり、電気泳動法により測定した等電点は9.2であり、SDS電気泳動法により測定した分子量は30,000であることを特徴とする新規耐熱性リパーゼ。

【請求項1】セルラーゼとグルコースオキシダーゼ、又はセルラーゼとβ―グルコシダーゼ及びグルコースオキシダーゼを含有する洗浄剤組成物。

【請求項1】リゾプス属以外から得られるペクチナーゼであって、少なくとも5ユニット/mg固形分以上の力価を有するペクチナーゼ及び界面活性剤5〜40重量％を含有することを特徴とする無燐洗浄剤組成物。

【請求項1】次の物理化学的性能を有するCMCアーゼII。

1. 作用
   

   カルボキシメチルセルロースに作用するC_x酵素活性のほか、弱いC_１酵素活性、β-グルコシダーゼ活性を有する。

2. 基質特異性

   カルボキシメチルセルロース、結晶性セルロース、アビセル、セロビオース及びp-ニトロフェニルセロビオシドに対して作用する。

3. 作用pH及び至適pHは約9.5である。

4. pH安定性

   30℃で1時間保持した場合、pH5〜12で失活しない。

5. 作用温度及び至適温度

   作用温度は、5〜58℃、至適温度は14〜45℃である。

6. キレート剤の影響

   EDTA、EGTA、NTA、STPP及びゼオライトは活性を阻害しない。

7. 界面活性剤の影響

   線状アルキルベンゼンスルホン酸ナトリウム(LAS)、アルキル硫酸エステルナトリウム塩(AS)、ポリオキシエチレンアルキル硫酸エステルナトリウム塩(ES)、α-オレフィンスルホン酸ナトリウム(AOS)、α-スルフォン化脂肪酸エステルナトリウム塩(α-SFE)、アルキルスルホン酸ナトリウム(SAS)、ポリオキシエチレンセカンダリーアルキルエーテル、脂肪酸塩(ナトリウム塩)及びジメチルジアルキルアンモニウムクロライドは活性を阻害しない。

8. プロテアーゼ耐性

   プロテアーゼに対して強力な耐性を有する。

9. 分子量(ゲルクロマトグラフィー法による)

   CMCアーゼIIの分子量は170,000±20,000である。

10. UV吸収スペクトル

    280nmに最大吸収を有し、また290nmに肩吸収を有する。

【請求項1】下記式(1)のアミノ酸配列で示される新規な耐熱性中性プロテアーゼ遺伝子を含有する、制限酵素Sau3AIにより切断された約18kbpであるバチルス・ステアロサーモフィルス(Bacillus stearothermo-philus)TELNE(FERM-P NO.9439)由来の染色体DNAをバチルス属に属する細菌内で複製するベクタープラスミドに連結し、得られた組換え体プラスミドでバチルス・ズブチルスを形質転換し、形質転換されたバチルス・ズブチルスを培養し、該培養物から耐熱性中性プロテアーゼを採取することを特徴とする新規な耐熱性中性プロテアーゼの製造方法。

【請求項1】アルカリセルラーゼをコードする、約10Kbの塩基対からなり、第1図に示す制限酵素地図を有するDNA断片。

【請求項1】次の性質を有する耐熱アルカリアミラーゼ。

1. 作用および基質特異性:デンプン、アミロース、アミロペクチン、およびそれらの部分分解物のα-1,4-グリコシド結合を特異的に加水分解し、主としてデキストリンおよびマルトオリゴ糖を生成する。



2. 至適pH:10.0〜10.5



3. 安定pH:60℃、30分間の加熱条件下で、pH6.0〜11.5において安定である。



4. 作用適温の範囲:至適作用温度は約75℃付近である。



5. 熱安定性:pH10.3のグリシン緩衝液中で30分間加熱した場合には65℃まで安定であり、カルシウムイオンを添加したpH9.5のグリシン緩衝液中で30分間加熱した場合には70℃まで安定である。



6. 分子量78000(SDS電気泳動法)

【請求項1】アスペルギルス(Aspergillus)宿主内における組換えヒュミコーラ(Humicola)リパーゼの製造方法であって、次の工程:

1. 1回のコピー又はそれ以上のコピーで適当なアスペルギルス宿主のゲノムに組込むことのでき;更にDNA配列が、プロモーター、転写開始部位、および転写ターミネーターおよびポリアデニル化機能のような遺伝子発現を促進する機能をコードするDNA配列、それによって上流活性化配列により先行されているプロモーター、およびヒュミコーラ属由来のリパーゼをコードするDNA配列を含んで成る組換え体DNAクローニングベクター系を得る工程;



2. 工程(a)で得た組換えDNAクローニングベクター系を用い、選ばれた選択マーカーに対し機能遺伝子を有しないアスペルギルス宿主を形質転換する工程;および



3. 適当な培地中で形質転換した宿主を培養し次いで所望により培地からリパーゼを回収する工程を含んで成る前記方法。

【請求項1】プルラナーゼ、イソプルラナーゼ及びイソアミラーゼからなる群から選ばれる1種又は2種以上の澱粉枝切り酵素を含有することを特徴とする洗浄剤組成物。

【請求項1】次の酵素化学的性質を有するアルカリプルラナーゼY。

1. 作用

   プルラン及び可溶性澱粉に作用し、プルランからは主としてマルトトリオース、可溶性澱粉から主としてマルトテトラオース及びマルトペンタオースを生成する。また、グリコーゲンにも作用し、マルトテトラオース及びマルトペンタオースを生成する。




2. 基質特異性

   プルラン、可溶性澱粉及びグリコーゲンに作用する。




3. 作用pH及び最適作用pH

   プルランに対する作用pHは5〜12の範囲であり、最適作用pHは8.5〜10の範囲である。また、可溶性澱粉に対する作用pHは4〜12の範囲であり、最適作用pHは7〜9.5の範囲である。




4. pH安定性

   プルランに対してpH6〜10.5の範囲で安定であり、可溶性澱粉に対してはpH4〜12の範囲で安定である(45℃、10分間処理による)。




5. 作用温度範囲及び最適作用温度

   プルラン及び可溶性澱粉に対して10〜65℃の範囲で作用し、その最適作用温度は約50℃である。




6. 温度安定性

   45℃までは極めて安定である(pH9.5の10mMグリシン−食塩−水酸化ナトリウム緩衝液中、30分間処理による)。




7. 分子量

   ソディウムドデシル硫酸(SDS)電気泳動法による分子量は200,000±5,000である。




8. 金属イオンの影響

   プルラナーゼ活性は、Hg²⁺、Mn²⁺、Pb²⁺で阻害される。また、α-アミラーゼ活性はHg²⁺、Mn²⁺、Pb²⁺、Zn²⁺、Cd²⁺で阻害される。